产品货号:
BTN130979
中文名称:
柱式血清血浆DNA提取试剂盒
英文名称:
Serum and Plasma Cell-free DNA Column Purification Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒基于离心柱层析法,用于从血浆/血清中方便、快速、可靠地提取游离循环DNA(circulating DNA、cell-free DNA,cfDNA)。
- 操作简单,整个过程只需要20分钟左右。
- 不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
- 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
- 与PCR、荧光PCR和LAMP等核酸扩增兼容。
- 可在30~100μL范围内灵活调节洗脱体积浓缩循环DNA。
组分 | 规格 |
血清血浆游离DNA溶液A | 30mL |
上柱结合液 | 40mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,有效期1年。溶液A长期(1月以上)放置时需要放4℃。
- 如果有N个样品,标记N+2个1.5~2mL螺旋盖塑料离心管,多出的一个为阳性对照(PC),一个为阴性对照(NC)。为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记,以在后续操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加入0.2mL血清或血浆,在PC管中加入已经确认有阳性DNA的血清或血浆,在NC管中加入已经确认没有阳性DNA的血清或血浆。
- 加入0.6mL柱式血清/血浆游离DNA到各离心管中,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
- 溶液A在4℃放置后可能会产生结晶,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
- 加入0.8mL上柱结合液到离心管中,颠倒混匀后转移一半的混合液约0.8mL到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
- 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
- 将剩余的另外一半裂解液约0.8mL转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
- 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
- 加入0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
- 加入0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤,可以跳过。
- 12000rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
- 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的1.5mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液3.0,然后室温放置2分钟。
- 12000rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为游离DNA溶液。
- DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
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